一、活動時間：2024.9.1~12.31

二、活動詳情：

NanoLuC螢光素酶報告基因載體

目前已構(gòu)建多種類型的NanoLuc螢光素酶報告基因載體，以滿足不同的實驗需求。非融合的Nluc提供了最大的光輸出和靈敏度；NanoLuc-PEST(NlucP)將蛋白表達水平變化與轉(zhuǎn)錄活性改變密切偶聯(lián)，并增加信噪比；融合N-末端分泌信號(secNluc)的NanoLuc螢光素酶適用于分泌型報告基因試驗。使用Nano-Glo螢光素酶檢測試劑，發(fā)光量在跨越1,000,000倍的酶濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，且信號半衰期≥2小時。

為滿足利用報告基因研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控，我們提供多種表達不同類型NanoLuc螢光素酶(非融合型Nluc,PEST不穩(wěn)定型NlucP,分泌型secNluc)的質(zhì)粒載體。不同的pNL載體用途如下：

·pNL1:克隆已知或預測的啟動子區(qū)域

·pNL2:克隆已知或預測的啟動子區(qū)域，并通過潮霉素(Hygromycin)篩選建立一個穩(wěn)定克隆的細胞系

·pNL3:克隆不需要基本啟動子的結(jié)合位點或應答原件(如pNL3.2.NF-KB-RE載體)

此外，還提供非融合和分泌型Nluc對照質(zhì)粒。pNL載體系列以pGL4為基礎(chǔ)設(shè)計，以方便從現(xiàn)有的質(zhì)粒上進行序列轉(zhuǎn)移。載體骨架設(shè)計還去掉了許多轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點和其他潛在的調(diào)控元件以減少反常結(jié)果的發(fā)生。對Nluc基因突變體進行了密碼子優(yōu)化，并去除了許多潛在調(diào)控元件或其他不必要的功能(如常見的限制性內(nèi)切酶位點)。

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